摘要：建立并驗(yàn)證小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA RT-qPCR 分析方法學(xué),研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì) 胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)單次靜脈注射后在重度免疫缺陷 NOG 小鼠體內(nèi)的組織 分布情況。目的 建立并驗(yàn)證小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA RT-qPCR 分析方法學(xué),研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì) 胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)單次靜脈注射后在重度免疫缺陷 NOG 小鼠體內(nèi)的組織 分布情況。>>>商務(wù)洽談，點(diǎn)此處，在線咨詢

方法 建立小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA 的 RT-qPCR 分析方法,進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍、準(zhǔn)確度 與精密度、穩(wěn)定性等方法學(xué)驗(yàn)證。 取 NOG 小鼠 36 只,雌雄各半,單次靜脈注射給予 HUCMSCs 3. 5 × 10 7 cells/ kg, 于 6、12、24、72 h、1 周、2 周各取 6 只小鼠麻醉,采集血液(EDTA 抗凝)后解剖,取肺、腎、心臟、肝、大腦、脊髓、胃、小 腸、脂肪、皮膚、脾、睪丸(子宮、卵巢)提取 DNA,用已驗(yàn)證的小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA RT-qPCR 分析方法測(cè) 定各組織中 HUCMSCs 的分布情況。 另選取 NOG 小鼠 18 只,雌雄各半,分為對(duì)照組 6 只、給藥組 12 只,分別靜脈注 射 0. 9%氯化鈉注射液、HUCMSCs 3. 5 × 10 7 cells/ kg,給藥期間觀察小鼠急性毒性反應(yīng)情況,給藥組于給藥后 72 h、 2、4 周各取 4 只動(dòng)物剖檢觀察臟器組織大體觀情況,取肺組織石蠟切片采用免疫組化法檢測(cè)線粒體蛋白表達(dá),分析 HUCMSCs 在肺組織中的定植情況。

結(jié)果 建立的小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA 的 RT-qPCR 分析方法各考察指 標(biāo)均符合驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn);NOG 小鼠單次靜脈注射 HUCMSCs 后,主要分布于肺和血液中(給藥后 1 周內(nèi)),肺組織濃度高 于血液,肺組織、血液中 HUCMSCs 濃度分別在 6 ~ 24 h、6 ~ 72 h 之內(nèi)維持相對(duì)平穩(wěn)水平,之后隨時(shí)間推移下降,其 他組織各采樣點(diǎn)均未測(cè)得 HUCMSCs 分布;定植結(jié)果顯示靜脈注射 HUCMSCs 后 72 h 可在肺部檢測(cè)到其存在,2 周 和 4 周時(shí)則未檢測(cè)到;單次靜脈注射 HUCMSCs 后 NOG 小鼠未見明顯急性毒性反應(yīng)。

結(jié)論 建立的 HUCMSCs 小 鼠組織中分布分析方法可靠、可行;NOG 小鼠單次靜脈注射 HUCMSCs 后主要于給藥后 1 周內(nèi)分布于肺和血液,72 h 主要定植于肺組織;單次靜脈注射 HUCMSCs 具有良好的安全性。

閱讀原文：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞單次靜脈注射NOG小鼠組織分布及其分析方法學(xué)研究.pdf

來源：中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)2023年第12期

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